Cara Menguji Nilai Anti-Oksidan pada Makanan atau Minuman

Daftar Isi

 

Cara Menguji Nilai Anti-Oksidan pada Makanan atau Minuman

Antioksidan adalah senyawa yang membantu melawan radikal bebas dalam tubuh, sehingga berperan penting dalam menjaga kesehatan dan mencegah berbagai penyakit. Untuk mengukur nilai antioksidan pada makanan atau minuman, para ahli menggunakan berbagai metode ilmiah yang terbukti efektif. Berikut ini adalah beberapa metode populer:

1. Metode DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl)

Metode ini mengukur kemampuan senyawa antioksidan dalam meredam radikal bebas DPPH, yang memiliki warna ungu. Saat senyawa antioksidan bereaksi dengan DPPH, warna larutan akan memudar menjadi kuning, menandakan penurunan radikal bebas.

Proses: Sampel dilarutkan, dicampur dengan larutan DPPH, dan diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang tertentu (biasanya 517 nm).

Hasil: Aktivitas antioksidan dinyatakan dalam IC50 (konsentrasi yang dibutuhkan untuk mengurangi 50% radikal DPPH). Semakin rendah nilai IC50, semakin tinggi aktivitas antioksidan.

2. Metode ABTS (2,2'-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid))

Metode ini menggunakan radikal ABTS yang berwarna biru-hijau. Antioksidan akan mengurangi warna ini, dan pengurangan intensitas warna diukur menggunakan spektrofotometer.

Proses: Larutan radikal ABTS dicampur dengan sampel, kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 734 nm.

Hasil: Aktivitas antioksidan dinyatakan sebagai Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC), yang membandingkan kemampuan antioksidan sampel dengan Trolox (vitamin E sintetis).

3. Metode ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity)

Metode ORAC mengukur kemampuan senyawa antioksidan dalam melindungi molekul fluoresen dari kerusakan akibat radikal oksigen.

Proses: Sampel dicampur dengan larutan fluoresen dan radikal peroksil, lalu penurunan fluoresensi diukur menggunakan fluorometer.

Hasil: Nilai ORAC dinyatakan dalam satuan mikromol Trolox equivalent per gram sampel. Semakin tinggi nilai ORAC, semakin tinggi kapasitas antioksidan.

4. Metode FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power)

FRAP mengukur kemampuan antioksidan dalam mereduksi ion besi (Fe³⁺) menjadi ion besi (Fe²⁺). Hasil reaksi ini menghasilkan warna biru yang intensitasnya diukur.

Proses: Sampel dicampur dengan larutan FRAP dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 593 nm.

Hasil: Aktivitas antioksidan dinyatakan sebagai kemampuan reduksi setara Trolox atau asam askorbat.

5. Metode CUPRAC (Cupric Reducing Antioxidant Capacity)

Metode ini mengukur kemampuan antioksidan dalam mereduksi ion tembaga (Cu²⁺) menjadi Cu⁺.

Proses: Larutan sampel dicampur dengan larutan Cu²⁺ dan reagen lainnya, kemudian diukur absorbansinya pada 450 nm.

Hasil: Aktivitas dinyatakan sebagai nilai setara dengan Trolox.

6. Metode TPC (Total Phenolic Content)

Meskipun bukan metode langsung untuk mengukur antioksidan, TPC digunakan untuk memperkirakan kandungan fenolik, senyawa yang sering bertindak sebagai antioksidan.

Proses: Sampel dicampur dengan reagen Folin-Ciocalteu dan larutan alkali, lalu absorbansi diukur pada 765 nm.

Hasil: Nilai TPC dinyatakan dalam satuan setara asam galat (GAE).

7. Metode EPR (Electron Paramagnetic Resonance)

EPR digunakan untuk mempelajari interaksi antioksidan dengan radikal bebas secara langsung dengan memantau sinyal elektron radikal.

Proses: Sampel ditempatkan dalam alat EPR, dan intensitas sinyal radikal diukur sebelum dan setelah reaksi.

Hasil: Penurunan sinyal menunjukkan kapasitas antioksidan.

Uji Lain Anti-Oksidan : ORP (Oxidation-Reduction Potential)

8. Uji ORP (Oxidation-Reduction Potential)

Uji ORP (Oxidation-Reduction Potential) adalah metode yang digunakan untuk mengukur kemampuan suatu larutan (misalnya makanan cair, minuman, atau sampel cair lainnya) untuk berperan sebagai oksidan atau reduktan. Dalam konteks antioksidan, uji ORP dapat memberikan informasi tentang kemampuan sampel untuk melawan oksidasi.

Apa Itu ORP?

ORP adalah nilai yang menunjukkan potensi larutan untuk melepaskan atau menerima elektron dalam reaksi kimia.

Nilai ORP diukur dalam milivolt (mV):

• Nilai positif (+): Menunjukkan sifat oksidatif (kemampuan untuk menerima elektron).
• Nilai negatif (-): Menunjukkan sifat reduktif (kemampuan untuk memberikan elektron), yang berkorelasi dengan kapasitas antioksidan.

Dalam makanan dan minuman, nilai ORP negatif sering diasosiasikan dengan manfaat kesehatan, karena menunjukkan kemampuan larutan untuk mereduksi radikal bebas yang merusak sel tubuh.

Bagaimana Uji ORP Dilakukan?

Persiapan Sampel:

Sampel cairan (seperti air alkali, jus, atau teh herbal) disiapkan dalam kondisi standar.

Penggunaan ORP Meter:

Alat pengukur ORP (ORP meter) digunakan untuk mencatat potensi oksidasi-reduksi. Sensor elektroda dicelupkan ke dalam sampel cair, dan alat akan memberikan nilai ORP dalam satuan mV.

Interpretasi Hasil:

• Nilai Positif (+): Mengindikasikan cairan cenderung oksidatif.
• Nilai Negatif (-): Mengindikasikan cairan bersifat reduktif atau memiliki aktivitas antioksidan yang baik.

Aplikasi ORP dalam Mengukur Antioksidan

Air Alkali: Air dengan nilai ORP negatif sering diklaim memiliki manfaat kesehatan karena mengandung ion-ion yang bertindak sebagai antioksidan.

Makanan atau Minuman Fermentasi: Nilai ORP negatif juga dapat ditemukan dalam makanan fermentasi seperti kombucha atau yogurt, yang sering memiliki kapasitas antioksidan tinggi.

Produk Antioksidan: Uji ORP sering digunakan oleh industri untuk memvalidasi produk seperti air ionisasi, minuman kesehatan, atau produk herbal.

Kelebihan dan Keterbatasan Uji ORP

Kelebihan:

• Cepat dan sederhana.
• Memberikan gambaran umum tentang sifat oksidatif atau reduktif larutan.
• Dapat digunakan untuk berbagai jenis cairan.

Keterbatasan:

1. Tidak memberikan informasi spesifik tentang jenis atau konsentrasi senyawa antioksidan dalam sampel.
2. Dipengaruhi oleh banyak faktor, seperti pH, suhu, dan kandungan ion dalam larutan.